Mi az a bakteriológiai kutatás? Milyen séma szerint történik? Mit jelent ebben az esetben a biztonság? Mik a bakteriológiai kutatás céljai és szakaszai?
Általános információ
A bakteriológiai vizsgálat egy tudományos folyamat, amelynek során a baktériumokat azonosítják és tulajdonságaikat tanulmányozzák a mikrobiológiai diagnózis felállítása érdekében. Itt nagyon fontos a létrejövő mikroorganizmus típusának vagy fajának meghatározása (a tiszta tenyészetről van szó). Ehhez társul az élőlények biokémiai és élettani tulajdonságainak, valamint a toxinképződésre való hajlam vizsgálata. Erre a célra kicsapási és agglutinációs reakciókat alkalmaznak. Azt is alkalmazzák, hogy a laboratóriumi állatokat megfertőzzék a kóros elváltozások későbbi kimutatásával.
Tesztanyaggal végzett munka
A bakteriológiai vizsgálati algoritmus előírja a speciális utasítások szigorú betartását. Ezért a vizsgálati anyagot steril edényekbe kell gyűjteni aszeptikus körülmények között. Arról is gondoskodni kellhogy a lehető leghamarabb biztosítsák a laboratóriumba szállítást. A minták hideg tárolása kívánatos. A bakteriológiai kutatás technikája számos lehetséges helyzetet biztosít. Így a tárgy típusa, a mikroorganizmus tulajdonságai és a betegség természete gyakran szükségessé teszi az egyéni munkautasítások kidolgozását. A munkában számos különféle módszert alkalmaznak. Az egyik leggyakoribb a bakterioszkópia. De ha a baktériumok nem rögzülnek, akkor összetört vagy lógó cseppet használnak. Megjegyzendő, hogy az utolsó két lehetőséget a fokozott fertőzőképesség jellemzi.
Bakterioszkópia
Ebben az esetben ütéseket használunk. Elkészítésükhöz a vizsgált folyadék egy cseppjét el kell osztania egy tárgylemez felületén. Zatesnek meg kell szárítania. Ez gyakran úgy történik, hogy a gyógyszert egy gázégőből nyert lángon keresztül mozgatják. Bár alternatívaként fixáló vegyületek is használhatók. Annak jelzésére, hogy előkészítő műveleteket végeztek ezzel a készítménnyel, elszíneződött. Az ilyen manipuláció célja a pontosság, ami nagyon fontos a mikroszkópos és bakteriológiai vizsgálat során. Hiszen ha más célra újrahasználja a gyógyszert, akkor zabkását kap, amivel nagyon nehéz lesz hatékonyan dolgozni.
Miért olyan népszerű a bakterioszkópia?
Nem utolsósorban a módszer elérhetősége miatt. Ha friss készítmény bakteriológiai vizsgálatát végezzük, akkor a kórokozó meghatározásáramikrokémiai reakciók vagy a mikroorganizmus különböző szerkezeti részeinek szelektív festése alkalmazható. Melyik a jobb? Pontosabb eredmény érhető el, ha színes készítménnyel dolgozunk. Ebben az esetben a vizsgálati anyagot egy előre elkészített tárgylemezre visszük fel. És ügyeljen arra, hogy vékony (és ha lehet egyenletes) réteget készítsen. Ezt követően meg kell várni, amíg a gyógyszer megszárad a levegőben. A mikroorganizmusokat ezután a hagyományos módszerek egyikével rögzítik. Ezt követően a lehűtött készítményt differenciál- vagy egyszerű festékkel festik. Ehhez száraz és natív készítmények használhatók. Ezt követően marad az ultraibolya vagy rövid kék sugarak irányítása az élőlények felhalmozódási helyére, amitől az egész mikroba vagy annak bizonyos testrészei világítanak.
A bakterioszkópia gyakorlati alkalmazása
Számos fertőző betegség diagnosztizálására használják. Ezek közül a leghíresebb a tuberkulózis, a gonorrhoea és a visszaeső láz. Ezenkívül kutatáshoz folyamodnak egy szerv vagy termék mikroflórájának teljes komplexumának tanulmányozása érdekében. A kritikusok azonban gyakran rámutatnak ennek a módszernek a viszonylagos megbízhatatlanságára és pontatlanságára.
Növények és baktériumkultúrák szubkultúrái
Végezze el ezeket Pasteur pipettával. A bakteriológiai és citológiai vizsgálatok elvégzése gyakran nehezen kivitelezhető oltás és szubkultúra nélkül a munkafolyamat során. Ha Pasteur pipettával dolgozik, annak hegyecsipesszel letörni. Ezt követően magát a szerszámot átvisszük az égő lángján, majd hagyjuk lehűlni. Vetéshez egyébként folyékony és szilárd tápközeg is használható. A választást befolyásolja, hogy a bakteriológiai kutatás milyen céljaira irányul. Ugyanakkor be kell tartani a munka algoritmusát és a biztonsági óvintézkedéseket. Tehát, ha folyékony tápközeggel dolgozik, ügyelni kell arra, hogy az ne folyjon ki, és ne nedvesítse be a parafa és a kémcsövek széleit. Ha a vizsgálatot szilárd anyaggal végzik, gyakran speciális tűt használnak a tenyészetbe való belépéshez. A vetést és az újravetést gázégő lángja közelében kell végezni. A kísérlet tisztasága érdekében a kémcső ne maradjon sokáig nyitva. Ami a kultúrával ellátott eszközt illeti: ügyeljen arra, hogy ne érjen hozzá semmihez. Ezenkívül a bakteriológiai kutatás technikája lehetővé teszi a kémcső széleinek elégetését a lezárás előtt. A készterméket a gyártás után azonnal alá kell írni a későbbi félreértések elkerülése érdekében.
Vetéshatékonyság
Úgy véljük, hogy ez a módszer pontosabb és megbízhatóbb adatok beszerzését teszi lehetővé a bakteriológiai diagnózis során, mint a korábban figyelembe vett bakterioszkópia. Ebben az esetben a műveletek algoritmusa a következő:
- Eleinte tiszta tenyészetet kennek a táptalaj felületére, amelyet egy Petri-csészébe öntenek.
- Az első vetést a faj számára kedvező körülmények között kell végeznimikroorganizmusok.
- Egy-két nap elteltével optimális környezet jelenlétében minden alkalmas telep odaköltözik, ahol maximálisan fejlődhet. Ez megszabadítja őket az idegen mikroflórától.
A végeredmény egy homogén baktériumok tenyészete, amely azonosítható.
Tiszta kultúrák
De hogyan készülnek? Ehhez biológiai és mechanikai módszereket alkalmaznak. Az első esetben nagy szerepe van a táptalajoknak, ahol adottak az adott kultúra fejlődéséhez szükséges feltételek. Egy megközelítés akkor is alkalmazható, ha egy bizonyos típusú baktériumra fogékony laboratóriumi állatok megfertőződnek. A mechanikai módszerek egy steril műszer használatán alapulnak, amellyel a tenyészetet az első, második és harmadik Petri-csészében elhelyezett tápközegbe helyezik. Ezután meg kell várni, amíg az egyes telepek felnőnek, és máris kiemelkedik közülük a tiszta kultúra. A baktériumokat speciális termosztátokban is lehet termeszteni, ahol a hőmérsékletet egy bizonyos szinten tartják (általában körülbelül 37 fok). Ebben az esetben a folyamat körülbelül egy napig tart. De a mikroorganizmusok típusától függően más feltételek is meghatározhatók. Szintén fontos a szükséges oxigénkoncentráció jelenléte. Ehhez használjon különféle levegőztetési módszereket. Eddig a helyzet egészéről és általánosságban beszéltünk, de most összpontosítsuk figyelmünket arra, hogy mi a bakteriológiai kutatás sémája.
Gyakorlás
Gyakran alkalmaznak egy sor módszert a kórokozó mikroorganizmusok kimutatására a páciens vagy potenciális hordozó szervezetében. Az alkalmazott anyagok és módszerek az elemzés céljaitól, valamint a munkavégzés környezeti feltételeitől függenek. A gyakorlatban a baktériumokat leggyakrabban egy személyből vagy állatból vett vérkultúrával mutatják ki. Ha a helyi elváltozások jól meghatározottak, akkor a kórokozók a problémás területeken kereshetők. Ez jellemző az olyan betegségekre, mint a vérhas, gonorrhoea, diftéria és számos hasonló. Különösen súlyos esetekben ez a folyamat a bakteriológiai vizsgálat külön szakaszaira oszlik (ami jellemző a tífuszra). Mindegyikük saját módszereit alkalmazza, amelyek célja a fertőzés okának megtalálása. Nézzük meg közelebbről a tífuszos helyzetet. A betegség első hetében a betegség diagnosztizálásának legmegbízhatóbb módja a vérkultúra. A második esetben egy szerológiai vizsgálat tekinthető ilyennek. A harmadik héten a székletet megvizsgálják. Az utolsó módszer a lábadozó betegek ellenőrzése.
Mikroorganizmus azonosítás
A festés folyamatával kezdődik. Aztán megnézik, hogy a baktérium hogyan tudja lebontani a szénhidrátokat, aminosavakat stb. Ezenkívül ez a folyamat kiegészíthető más tulajdonságok vizsgálatával, amelyekkel az egyes mikroorganizmusok nemzetségei vagy fajai rendelkeznek. Példaként meg kell említeni a különböző állatok eritrocitáinak oldódási lehetőségeit, a vérplazma koagulációjára és a vérrög oldódásra gyakorolt hatását.fibrin és így tovább. Mindez a mikrovilág egyes képviselőinek sajátosságai. A szerológiai azonosítás is felhasználható a végső felismeréshez (de ez általában a bélrendszer családjába tartozó patogén baktériumokra vonatkozik).
Következtetés
Megjegyzendő, hogy számos mikroorganizmus nem azonosítható a cikkben leírt módszerekkel. Ebben az esetben széles körben alkalmazzák a laboratóriumi állatok fertőzésének gyakorlatát. A számítás azon a tényen történik, hogy megjelenik a jellegzetes toxicitás vagy patogenitás, amely mesterséges körülmények között nem figyelhető meg. A fertőzés a kórokozó mikrobák felhalmozódásának módszereként is használható. Már ha a vizsgált tenyészet biológiai, morfológiai, szerológiai és biokémiai tulajdonságok vizsgálata során feltárt jellemzőit összehasonlítjuk, kijelenthetjük, hogy ismert, milyen mikrobákkal van dolgunk. Az azonosítás a baktérium nemzetségének, fajának és típusának megjelölését jelenti. Ha a vizsgált mikroorganizmus bizonyos tulajdonságaiban eltér jellemző jellemzőitől, akkor ezt jelezni kell. Számos szakértő úgy véli, hogy ilyen esetekben hasznos lesz újra azonosítani az összes használt módszert és technikát. Néha a kutatás magasabb szintre emelhető, ami komolyabb (és költségesebb) megközelítést igényel. Ha negatív eredmények születtek, akkor ez azt jelzi, hogy a készítménymikroorganizmusok hiányoztak, vagy nem voltak életképesek. De a kutatás pontossága érdekében, ha számos bacilus hordozó gyanúja merül fel (dizentéria, diftéria, tífusz), ilyen esetekben ismételt ellenőrzést mutatnak be. Erre azért van szükség, hogy a szakembereknek pontos elképzelésük legyen arról, hogy mivel kell foglalkozniuk.