A cikkben gondolja át, mi az - PCR-diagnosztika? A humán papillomavírus (HPV) ma nagyon gyakori betegség, amely krónikus formában fordul elő, és gyakori visszaesésekkel jár. A polimeráz láncreakció (PCR) a legmodernebb módszer a papillomavírus diagnosztizálására. Ezt a módszert nagyon megbízhatónak tekintik, és nemcsak ennek a vírusnak az emberi szervezetben való jelenlétét, hanem mennyiségét és változatosságát is azonosítja. A HPV PCR-analízise még a vírus inaktív formáira is érzékeny, amelyekben nincsenek külső megnyilvánulások genitális szemölcsök és papillómák formájában.
Mire épül a módszer?
A páciens DNS-ének vizsgálatán alapul, hogy kimutatható legyen az idegen komponensek jelenléte ebben a láncban. Négy nukleotidból áll, amelyek meghatározott sorrendben helyezkednek el. Ha egy vírus bejut a szervezetbe, akkor ebben a láncban megváltozik a sorrend, ami lehetővé teszi a legjelentéktelenebb idegen részecskék aktivitásának gondos figyelemmel kísérését. A HPV PCR kutatási technikát vírusrészecskék felhasználásával végzik, amelyek meghatározzák a sejtosztódás sebességét.
Mi határozza meg a kutatást?
Ez a diagnosztikai elv lehetővé teszi a HPV aktivitás nyomon követését nem csak a passzív állapotban, hanem az inkubációs időszak alatt is. A PCR diagnosztika meghatározza:
- HPV jelenléte a szervezetben;
- törzsek, amelyek megfertőzik a beteget;
- mennyiségi tartalom a szervezetben.
A papillomavírus a legtöbb embert megfertőzte, de az erős immunvédelem elnyomja a megnyilvánulásait, és nem engedi elszaporodni. A HPV kvalitatív kimutatása tehát nem mindig indokolható, hiszen nem racionális, ha vírusrészecskék jelen vannak a szervezetben, de hatásuk olyan minimális, hogy az embert semmilyen módon nem károsítja. A kvalitatív elemzés pozitív eredményt mutat, és ez gyakran összezavarja az embert.
Kvantitatív módszer
Ezért a diagnózis felállításához leggyakrabban kvantitatív módszert alkalmaznak, amely lehetővé teszi a vírusos ágensek számának nyomon követését a szervezetben és annak megállapítását, hogy mennyire veszélyes tevékenységük. Ezenkívül fontos meghatározni a HPV-törzsek sokféleségét. Az onkogenitás mértéke szerint vannak felosztva: egyesek az onkológiai megbetegedések előfordulásának fő tényezőjévé válhatnak, míg mások teljesen biztonságosak és csak néhány kozmetikai problémát okozhatnak.
Minden egyes helyzet egyéni megközelítést igényel,ezért a laboratóriumi vizsgálat előtt tanácsos szakképzett szakemberrel konzultálni, aki elmondja, hogyan és mely törzsekre lenne a legjobb a vizsgálatot végezni, figyelembe véve a páciens állapotát és klinikai tüneteit.
Vezetési jelzések
A HPV kimutatására irányuló PCR-teszt elvégzésének legjelentősebb oka a szemölcsök jelenléte a testen.
A vírussal való megfertőződés csak személytől lehetséges. A véráramba való behatolás után a kórokozó mikroorganizmus szaporodni kezd a bőr felső rétegeiben, ami jellegzetes megnyilvánulások kialakulásához vezet - condylomák vagy papillómák kialakulásához. Mivel ez a betegség meglehetősen gyakori, és a lakosság csaknem 80%-ában fordul elő, rendkívül magas a megbetegedési valószínűsége. A papillomavírusok az alábbiakon keresztül terjednek:
- védtelen közösülés;
- csók közben;
- amikor gyermeket szül anyától;
- háztartási módon;
- szoros bőrkontaktussal.
A HPV vérvizsgálatának és PCR-kenetének fő indikációi ennek a betegségnek a bőrtünetei, amelyek úgy néznek ki, mint egy fonalszerűen vékony száron lógó szemölcsök. Még ha nem is figyeltek meg ilyen condylomákat a bőrön, a vírus továbbra is jelen lehet a vérben, de lefolyása tünetmentes lesz. Ha egy betegnél a 18. és 16. altípusú papillomavírus fertőzést diagnosztizálnak, javasolt, hogy rendszeresen vizsgáltassák meg szakorvossal, például nőgyógyászral és urológussal, végezzenek diagnosztikai eljárásokat és végezzenek HPV-tesztet. Csak időben történő diagnózissal lehet megelőzni bizonyos rákos megbetegedések kialakulását.
A technikák típusai
A HPV PCR-diagnosztikájának részeként négy fő vizsgálati módszert fejlesztettek ki, amelyek mindegyike rendelkezik bizonyos sajátosságokkal, és a beteg állapotát figyelembe véve írják elő. A legjobb módszer kiválasztásához szakértői tanácsra van szükség. Tehát négy módszer:
- Kvalitatív módszer, amelyet a vírus szervezetben való jelenlétének cáfolására vagy megerősítésére használnak. Legfőbb hátránya, hogy nem lehet megállapítani a HPV törzs típusát (csak 14-21 típus). Leggyakrabban kvalitatív módszert alkalmaznak a papillomavírus kimutatására szolgáló egyéb módszerekkel egyidejűleg. Az eredmény két értékeléssel kerül jelentésre: „nem található” vagy „észlelve”. Vagyis ez a technika vagy megállapítja az idegen DNS jelenlétét, vagy jelzi annak hiányát.
- A genotipizálás egy olyan módszer, amely képes meghatározni egy vírus jelenlétét az emberi szervezetben, és megállapítani annak változatosságát. Ezt a módszert olyan esetekben alkalmazzák, amikor meg kell állapítani, hogy a vírus DNS-e megmarad-e a kezelés után, vagy új fertőzés következtében visszaesés figyelhető meg. A genotipizálás segít a terápia hatékonyságának értékelésében a HPV típusának meghatározásával. Ha ez ugyanaz a törzs, mint amivel a beteget kezelték, akkor a kezelés sikertelen volt. Ha az elemzés más típusú HPV jelenlétét mutatja, ez jelezhetiújrafertőzés.
- Kombinált módszer, amely egy rendkívül speciális diagnosztikai módszer, amely a kvalitatív és a genotipizálást használó 16 törzs kimutatás kombinációján alapul. Az eredményt 3 válasz jellemezheti: „16-os törzs észlelve”, „nem észlelt” és „HPV 16-os típust is beleértve kimutatva”. Ezt a módszert akkor alkalmazzák, ha olyan papillomavírus jelenlétére gyanakszik, amely méhnyakrákot okozhat nőkben.
- A magas onkogén kockázatú HPV kvantitatív PCR-módszere, amely lehetővé teszi a vírus vérszintjének meghatározását és fejlődésének nyomon követését. Ez a leginkább informatív, mivel lehetővé teszi a kóros folyamat súlyosságának meghatározását, amely alapján kiválasztják a megfelelő kezelést. A technika a vizsgált 100 ezer vírussejtek számának meghatározásán alapul. Ha összességük 5 felett van, ez a papillomavírus magas koncentrációját jelzi a szervezetben, ami növeli a rákos sejtek valószínűségét. Ha a mennyiség kisebb, mint 3, akkor a koncentráció elhanyagolhatónak minősül.
Hogyan készüljünk fel és töltsük le a tesztet?
Vér vehető bioanyagként a HPV-hez, de férfiaknál a húgycsőből, nőknél pedig a méhnyakból váladékot vesznek leggyakrabban.
A HPV-re vonatkozó PCR-hez nem szükséges speciális felkészülés. A fő feltétel az, hogy ne vizeljen néhány órával az eljárás előtt. Ezenkívül tanácsos, hogy a vizsgálat előtt 2-3 nappal ne legyen szexuális kapcsolat, és nemigyon alkoholos italokat. Ugyanakkor ne feledkezzünk meg az intim higiéniai eljárásokról sem.
Férfiaknak
A férfiak kenetet vesznek – a pénisz fejét és a húgycsövet sóoldattal kezelik. A szakember egy speciális kefét használ, amelyet körülbelül 4 cm-rel a húgycsőbe helyeznek, enyhe forgatással biológiai anyagot gyűjtenek, kémcsőbe helyezik és kutatásra a laboratóriumba küldik. Ugyanakkor az átvételtől számítva legfeljebb 2 napig tárolhatja.
Nők
A nőknél a HPV kimutatására szolgáló PCR-elemzés céljára történő kenést a következőképpen végezzük: steril oldatot viszünk a méhnyakra, majd ecsettel a méhnyakcsatornából tampont veszünk. A készüléket körülbelül 1 cm mélységig helyezik be, majd az orvos forgó mozdulatokkal lekaparja a csatorna falait. A biológiai anyagot egy speciális kémcsőbe helyezik, ahol körülbelül 15 másodpercig marad. Ebben a szakember a falakhoz törli, majd kiveszi. Ezután a kémcső tartalmát elküldik laboratóriumi vizsgálatra.
A kutatási anyag megfelelő mintavétele a sikeres diagnózis és a megbízható eredmény kulcsa. Ha egyidejűleg megsértik a sterilitást, és idegen mikroorganizmusok hatolnak be a kémcsőbe, az elemzés során vírust lehet felismerni, amely valójában nincs a páciens testében. Hiba is előfordulhat a kutatáshoz felvett kevés anyag miatt.
Hol lehet PCR-t venni HPV-re, sok embert érdekel. A vizsgálatokat bármely orvosi rendelőben el lehet végezniklinikán vagy laboratóriumban, például az "Invitro" vagy a "Hemotest" programban.
A módszer előnyei
A PCR az egyik fő diagnosztikai módszer, és jelenleg is a legnépszerűbb az orvosok körében. Ezt a vizsgálatot nemcsak a HPV kimutatására végzik, hanem lehetővé teszi más kóros mikroorganizmusok kimutatását is, amelyek szexuális érintkezés útján továbbíthatók. Egy ilyen elemzés segít diagnosztizálni a rejtett fertőzéseket, a hepatitist stb. A HPV PCR-tesztje számos előnnyel rendelkezik a betegségek kimutatására szolgáló egyéb módszerekkel szemben. Ezek az előnyök:
- Magas specifitás. Az elemzés nagy valószínűséggel segít elkülöníteni az idegen DNS nyomait az összegyűjtött bioanyag tanulmányozása során.
- Nagy teljesítmény. A PCR-vizsgálat egy automatizált folyamat, amely segíti a vizsgálat közvetlenül az elemzés napján történő elvégzését. Ez a sebesség lehetővé teszi, hogy az ember sokáig ne aggódjon az eredmények miatt, és néhány napon belül a kezébe kerüljön.
- Magas érzékenység. A tesztelés lehetővé teszi a vírusok aktivitásának vizsgálatát még az inkubációs időszakban is, amikor koncentrációjuk nagyon alacsony. Ez segít megelőzni a kóros folyamatok előfordulását és időben elkezdeni a terápiát.
- Több elemzés egyidejű elvégzésének lehetősége. Egyetlen vérvétel alapján diagnosztika végezhető több betegség egyidejű meghatározására. Például egyszerrea gonorrhoea és a chlamydia kórokozójának azonosítására. Ugyanakkor ez az eljárás nem lesz képes negatívan befolyásolni az eredmény megbízhatóságát.
A tanulmány hibái
Az elemzés nagy népszerűsége és informatívsága ellenére a HPV PCR-diagnosztikájának vannak negatív vonatkozásai is. Ezek közül a legfőbb a hamis pozitív eredmények valószínűsége. Ez akkor történik, amikor a terápia már megtörtént, a fertőzés elpusztult, de az elh alt vírussejtek még mindig a szervezet szöveteiben maradnak. A sejtek megújulása eltart egy ideig. Ha a kezelés után 2-3 hónappal korábban végez vizsgálatot, a PCR pozitív eredményt mutathat. A technika nem észlel különbséget, mivel a vírus DNS felkutatására irányul, amely még a már elh alt sejtekben is megtalálható. Ez hozzájárul a hamis pozitív eredményekhez. Ez a helyzet elkerülhető, ha a kezelőorvos által meghatározott időkereten belül elvégzik a laboratóriumi vizsgálatot.
Átirat
Mit fog mutatni a HPV PCR visszafejtése?
Az orvosnak értelmeznie kell a vizsgálati eredményeket. De az is fontos, hogy a páciens tisztában legyen az eredménylap felépítésével. Ha az elemzés azt jelzi, hogy „DNS nem észlelhető”, akkor nincs papillomavírus a vérben. Ha az Lg mutató 5 vagy több, ez a vér magas koncentrációját jelzi, Lg 3-5 - jelentős mennyiség, 3-nál kisebb - jelentéktelen mennyiség.
Hamis negatív elemzés
Valamint,hamis negatív elemzés előfordulhat. Akkor fordul elő, ha:
- a begyűjtött biológiai anyagot nem megfelelően tárolták vagy szállították;
- sérültek a steril körülmények, és más mikroorganizmusok kerültek a beteg vérébe;
- a reagensek alkalmatlansága miatt.
A hamis negatív eredmények lehetőségének kiküszöbölése érdekében ehhez az elemzéshez egy jóváhagyott laboratóriumot kell kiválasztani, magasan képzett személyzettel.
Részletesen megvizsgáltuk, hogyan és miért történik a PCR diagnosztika. Most már világos, hogy mi ez.
